HPLC法中，等度与梯度洗脱有什么区别

HPLC法中，等度与梯度洗脱有什么区别

等度洗脱中，流动相的组成是恒定不变的；梯度洗脱中，流动相的成分按照程序的设定随时间变化

梯度洗脱：在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比 等度洗脱则是指从头到尾只是用同一个流动相。 用不用梯度洗脱，主要看杂质的情况。同一物质有梯度和等度两种条件时，梯度的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好（不好的话就要用梯度）。 （1）杂质和主成分极性相差很大，杂质一定要全部都能洗脱出来（有时等度情况下从两三个小时杂质也冲出不来，就必须考虑等度）。 （2）杂质和主成分极性相差较大，杂质出峰太晚（等度冲两个小时出来个杂质，就可以通过梯度缩短检样时间） （3）还有就是杂质极性比主峰的大，等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边，杂质分开主峰又出峰太晚，这种情况也得考虑梯度洗脱。 在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度，毕竟用梯度要麻烦一些。 希望对你有帮助。