如何判断一段基因是否容易表达
答案:1 悬赏:10
解决时间 2021-02-26 17:31
- 提问者网友:富士山上尢
- 2021-02-26 08:49
如何判断一段基因是否容易表达
最佳答案
- 二级知识专家网友:荒野風
- 2021-02-26 10:05
判断一段基因是否表达的方法:
细胞水平:如果转进去的目的基因带有标记,例如荧光,那么用倒置荧光显微镜就可以看到,有荧光,则基因表达,当然这必须细胞本身没有荧光才行。
蛋白水平:将样品收集,裂解,用蛋白免疫印记法(Western Blot)来检测,根据曝光条带判断有无目的蛋白的表达,从而证实基因的表达。
分子水平:样品提RNA,做逆转录PCR(RT-PCR),之后以逆转录完成的cDNA为模板,用设计好的引物对此模板进行PCR扩增,之后电泳检测,看是否有目的基因DNA;或者直接用实时定量荧光PCR(QPCR)来检测目的基因的表达(根据图谱来看)。
细胞水平:如果转进去的目的基因带有标记,例如荧光,那么用倒置荧光显微镜就可以看到,有荧光,则基因表达,当然这必须细胞本身没有荧光才行。
蛋白水平:将样品收集,裂解,用蛋白免疫印记法(Western Blot)来检测,根据曝光条带判断有无目的蛋白的表达,从而证实基因的表达。
分子水平:样品提RNA,做逆转录PCR(RT-PCR),之后以逆转录完成的cDNA为模板,用设计好的引物对此模板进行PCR扩增,之后电泳检测,看是否有目的基因DNA;或者直接用实时定量荧光PCR(QPCR)来检测目的基因的表达(根据图谱来看)。
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