如何提取肝脏线粒体

如何提取肝脏线粒体

细胞色素是一类含有铁 啉基团的电子传递蛋白,只存在于需氧细胞中.细胞色素在线粒体内膜上起传递电子的作用.细胞色C (cytochrome c) 是细胞色素一种.它在线粒体呼吸链上位于细胞色素B 和细胞色素氧化酶之间,是呼吸链的一个重要组成部分.每分子细胞色素C含有一个血红素和一条多肽链.现已从许多来源获得细胞色素C结晶,并已对100多种细胞色素C蛋白的一级结构进行了测定.结果表明,细胞色素C的氨基酸残基的数目在103~113之间；不同来源细胞色素C的的氨基酸残基的顺序及含量都有一定的差异.细胞色素C中赖氨酸含量较高,等电点为10.7,含铁量为0.38%~0.43%,Mr为12000~13000,猪心细胞色素C分子量12200.细胞色素C是一种稳定的可溶性蛋白,它易溶于水及酸性溶液,故常用酸性水提取.细胞色素C分为氧化型和还原型两种,氧化型水溶液呈深红色,还原型水溶液呈桃红色.细胞色素C对热比较稳定,不易变性.pH 7.10.2,100℃加热3分钟,细胞色素C氧化型和还原型变性程度均为18%~28%,若增加加热时间,氧化型的不可逆变性程度比还原型的为高.细胞色素C对酸碱也较稳定,可抵抗0 .3mol/L氢氧化钾溶液的长时间处理.一般都将细胞色素C制成还原型的,因为比较稳定并易于保存.