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细胞离心后没有沉淀,为什么? 急啊

答案:2  悬赏:30  
解决时间 2021-03-01 03:20
我养的是外周血单个核细胞,加了药之后提蛋白,但是离心后根本一点细胞沉淀都没看见,再把培养基拿去显微镜下看也没有细胞。。。好奇怪呀,各位大侠指导指导吧! 呵呵,感激不尽
最佳答案
博凌科为解答:在离心的过程中是否配平?转速是否达到预期转速?如存在,配平,调转速。若没有以上情况,在离心后应立即取出离心管倒出废液,否则时间长了可能把细胞也倒出了,这也是可能的原因,培养瓶中没有,只是说明你消化细胞比较完全,只可能是你把细胞倒掉了!
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首先,没有沉淀并不等于没有得到rna。出现沉淀是因为rna量积累到一定程度而让肉眼能看到。我以前提的rna都没有沉淀,但是电泳和od值检测的结果都还可以,因为每个管中的样品量少,所以得到的rna量也少不够形成沉淀。(当然,有沉淀的也不等于就是得到的是rna,也有可能是蛋白) 如果真想看到沉淀才安心,可以在加入样品时多加点,但要记得裂解液也要相应的多加点,否则会得不偿失。因为如果裂解液不够,那么可能会无法有效抑制内源性rnase,可能最后得到的rna量不多而且质量差。还有,可以在加入异丙醇后放到-20度冰箱中,可以促进rna沉淀。
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