教育问题评析

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1.流式细胞术的发展历史和工作原理。对该技术与荧光编码微球技术相结合而发展起来的高通量细胞和生化分析技术及其最新发展作了评述。流式细胞术是一种对流动液体中排成单列的细胞逐个进行检测的技术，通过检测得到相应细胞的光散射和荧光信号，进而测定细胞的大小、形状、DNA、RNA、表面受体、酶活性、膜通透性和钙流量等，在癌症和爱滋病研究、新药开发、干细胞和基因治疗、遗传学、家畜性别选择、农作物新品种开发等方面都有广泛应用。采用顺序进样技术，则可不必加压而实现少量样品的自动分析和作亚秒水平分子相互作用的动力学测量。将该技术与近年发展起来的荧光染料编码微球技术相结合，则成为一种可以与生物芯片技术相媲美的多组分同时分析技术。采用微流控芯片技术和发光半导体量子点编码微球技术，进一步改善了方法的适用性，某些主要性能甚至超过了生物芯片技术，有望从研究实验室逐步进入临床实验室，最终进入病房和寻常百姓家，成为防病、诊断和监护病人的重要手段。 2.随着高科技的引用和基础医学的发展，各种先进的血细胞分析测试技术被应用到血细胞分析仪上。1987年Coulter公司发明的VCS(Volume，V，体积；Conductivity，C，电导性；Scatter，S，光散射)技术可使血细胞未经任何处理，在与体内形态完全相同的自然状态下得出检测结果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血细胞分析仪中采用了阻抗和射频技术联合的白细胞分类法。进入90年代后，仪器的自动化程度增高(达到120份/小时)；可进行多参数分析(高达30余项)；精密度高(重复计数；保证微孔管清洁；取中段血；运动流式细胞计数原理；鞘流原理……)；向5分类及鉴别幼稚细胞发展；准确度好，全面质量管理，保证仪器检测可靠性；具有智能化，可对同一病人诊断的前后进行对比，提出综合意见，确定诊断方向；更加注意保护操作人员的安全(SLS-Hb、自动混匀、进样、吸样针内外清洗等)；向流水线发展，将血细胞分析仪、网织红细胞计数仪、推片、染色机联成流水操作线。3.所谓细胞工程，就是应用细胞生物学和分子生物学的方法，在细胞水平进行的遗传操作。它的建立是与细胞融合现象的发现及其研究密切相关的。最早是由马勒在1838年报道了他在脊椎动物肿瘤细胞中观察到了多核现象。当时，人们的传统知识是一个细胞只有一个细胞核，因此多核现象的发现虽引起人们广泛的兴趣，但一般认为这只是一种特殊的事例。1849年罗宾在骨髓中也发现了多核现象的存在，1855～1858年，科学家们在肺组织和各种正常组织及发尖和坏死部位都发现了多核细胞。这样，自然界中广泛存在着多核细胞的事实，才被生命科学工作者们普遍接受。