水稻原生质体的制备

答案:2 悬赏:80

解决时间 2021-01-03 08:23

提问者网友：践踏俘获
2021-01-02 21:53

怎么样利用水稻的愈伤组织制作原生质体（用于转化），谢谢

需要具体的步骤，水稻的叶片叶可以。

最佳答案

二级知识专家网友：转身→时光静好
2021-01-02 23:15

往含愈伤组织的培养液中加入纤维素酶和果胶酶，除去愈伤组织的细胞壁即得到原生质体。具体步骤怎样，我没做过此实验，不能凭空编造，我也不清楚。

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1楼网友：安稳不如野
2021-01-02 23:52

去掉植物细胞壁的方法可以是机械的人工操作，也可以利用酶解法。较早利用机械法制备原生质体的首推klercker（1892），直到1960年英国科学家cocking才第一次用酶法大量制备原生质体。酶法去除cw： ① 撕叶下表皮 ② 酶解将撕去下表皮的叶片剪成小块，放在盛有5ml酶液的小培养皿中，让去除下表皮的一面接触酶液，辅满一层，在25~28℃下酶解60~90分钟而后是收集纯化（1）用吸管将酶解液吸至5ml离心管中，以600rpm离心5分钟以上，使原生质体沉降（2）将上清（酶解液）回收，剩下原生质体及残渣于管底（3）加氯化钙液约2ml，轻轻吹打均匀（4）用注射器向离心管底部缓缓注入蔗糖约2—3ml，出现下部蔗糖液，上部原生质体悬浮液（5）以600rpm离心10分钟，在两液相之间出现一条绿色带，便是纯净的原生质体

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