植物体细胞胚胎发生有哪些途径?

植物体细胞胚胎发生有哪些途径?

其一，体细胞胚是离体培养的产物，只限于在离体培养范围使用，以区别于无融合生殖胚；
　　其二，体细胞胚起源于非合子细胞，以区别于合子胚；
　　其三，体细胞经过了胚胎发育过程，以区别与离体培中器官发生形成个体的途径。
1、体细胞胚从外植体上直接发生在以叶片为外植体的培养中，体细胞胚的直接形成可分为两个阶段：
　　第一个阶段为诱导期。在此阶段中，叶片表皮细胞或亚表皮细胞感受培养刺激，进入分裂状态。
　　第二个阶段是胚胎发育期。在这一阶段，形成的瘤状物继续发育，经过球形胚、心形胚等发育过程，最后形成体细胞胚。
　　2、经过愈伤组织的体细胞胚发生
　　经过愈伤组织的胚胎发生需要三个培养阶段：
　　第一阶段是诱导外植体形成愈伤组织；
　　第二阶段是诱导愈伤组织胚性化；
　　第三阶段是体细胞胚形成。
　　在以幼胚、胚以及子叶为外植体时，通常可以直接诱导胚性愈伤组织产生，进而发生体细胞胚。因此，经过愈伤组织的体细胞胚胎发生，胚性愈伤组织的形成是培养的关键。
　　体细胞胚的结构与发育特点：
　　1、与器官发生形成个体的途径相比：
　　体细胞胚发育再生植株有两个明显的特点。一是体细胞胚具有双极性（double polarity），二是体细胞胚形成后与母体的维管束系统连系较少，即出现所谓的生理隔离（physiological isolation）现象。
　　由于大多数体细胞胚起源于单细胞，因此对于单个植株来讲，通过体细胞胚形成的再生植株，其遗传特性相对稳定。
　　2、与合子胚相比：
　　合子胚在发育初期具有明显的胚柄，而体细胞胚一般没有真正的胚柄只有类似胚柄的结构。特别是那些发育初期类似于动物胚胎发育途径的体细胞胚，这一点更为明显。
　　合子胚的子叶是相当规范的，可以作为分类的依据，而体细胞胚的子叶常不规范，有时具有两片以上的子叶。
　　与相同植物比较，体细胞胚的体积明显小于合子胚。
　　体细胞胚没有休眠而体细胞胚则直接形成植株。合子胚在胚胎发育完全进入子叶期以后，经过一系列的物质积累和脱水就进入休眠。

将植物细胞a与植物细胞b用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体a和原生质体b，运用物理方法或是化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。 ①杂交时间：植物细胞杂交是从细胞融合开始，到培育成的新植物体结束。 a.原生质体制备：用酶解法去除细胞壁（纤维素酶和果胶酶） b.原生质体融合：膜融合（高钙、高ph诱导融合）、核融合（杂种细胞第一次有丝分裂时融合） 原生质体的融合 1．peg诱导融合法  peg诱导融合的特点：其优点是融合成本低，勿需特殊设备；融合子产生的异核率较 高；融合过程不受物种限制。其缺点是融合过程繁琐，peg可能对细胞有毒害。  peg的作用机理： kao等认为，由于peg分子具有轻微的负极性，故可以与具有正极 性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成h键，从而在原生质体之间形成分子桥，其 结果是使原生质体发生粘连进而促使原生质体的融合；另外，peg能增加类脂膜的流动 性，也使原生质体的核、细胞器发生融合成为可能。