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为什么细菌DNA提取后的量很少?

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解决时间 2021-04-18 12:16
为什么细菌DNA提取后的量很少?
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先裂解菌体使DNA溶解,然后去除蛋白质,再通过无水乙醇或异丙醇的沉淀,离心即可得到,在此过程DNA会损失一部分
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为什么细菌dna提取后的量很少 菌落pcr的假阳性高很可能是因为你做pcr的循环数过大,我们实验室一般对于高拷贝数的质粒,循环数不会超过25个,一般用25个。 假阳性出现的原因关键在于做连接的时候加了比较多的目的基因的酶切产物,在转化时,那些没有连接入载体的pcr产物,有的。 1.定量检测: 可以用nanodrop去测dna总浓度 2.定性检测: 1.可以设计随机几对特定基因序列(位于genome上)的引物去pcr,看看有没有目标片段 2.同理,看看genome上有没有随机分布的酶切位点,用酶切,然后跑胶看看有没有目标片段 3.直接送公司测序,只要有钱!!!
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