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检测目的基因是否表达的方法是

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解决时间 2021-03-22 14:11
检测目的基因是否表达的方法是
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基因工程第四步中包括导入检测,转录检测和翻译检测,方法分别是DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术。有的还可在个体水平是进行检测,如抗性检测等
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抗原-抗体杂交法
RNA水平的检测:RT-PCR;Northern blot 蛋白水平的检测:western blot,ELISA 另外就是跟这个蛋白性质相关的生化方法。

最直接的就是检测目的蛋白,一般都是用western blot;如果是分泌蛋白,可以做elisa;如果蛋白有特殊的功能(比如gfp,绿色荧光蛋白),也可以直接检测其功能(比如看有无绿色荧光)。

间接的话,可以检测目的mrna是否存在,用的是northern blot或者rt-pcr。要注意的是,因为翻译阶段有可能存在调控,所以有些情况下mrna存在不代表蛋白存在,即基因转录了未必翻译。所以间接的手段一般作为旁证。

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