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请教:豆粕脲酶活性PH增值法

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解决时间 2021-03-05 14:32
豆粕脲酶活性PH增值法的检测方法是怎样的??
最佳答案
一、原理:豆粕中的脲酶可以使尿素分解产生氨,使体系中PH值增大。用PH计或酸碱指示剂测定其PH变化,以判性。 二、试剂: 1、尿素GB696,分析纯; 2、0.05mol/L磷酸氢二钾溶液:称取5.0706克磷酸氢二钾,加新煮过的蒸馏水(需冷却)溶后转移至500ml容量瓶,定容至刻度。 3、0.05mol/L磷酸二氢钾溶液:称取3.40克磷酸二氢钾,加新煮过的蒸馏水(需冷却)溶后转移至500ml容量瓶,定容至刻度。 4、磷酸缓冲溶液(PH7.0):取61.1毫升的试剂2与38.9毫升的试剂3混合(试剂纯粹时,用此法配制,否则应稍变更两种溶液的比例,使混合液PH值为7.0),此溶液可保存三个月。 三、仪器: 1、PH计 2、恒温水浴锅 四、步骤: 称取经粉碎(约40目,且样品粉碎过程中应避免发热)的样品10.0克,于带塞的锥行瓶中,加水100.0毫升,振荡30分钟,过滤样液备用(宜当天测定)。吸取2.0毫升样液,VC与带塞比色管总。加PH缓冲液(试剂4)8毫升,加0.2克尿素,摇匀11分钟,放置在30±5度水浴中保温30分钟,同时作样液空白,即2.0样液,加8.0毫升缓冲液,在水浴锅中同时保温,管内容物冷却后,测定PH值。 五、计算: 脲酶活性指数=PH1-PH0 PH1:样液对尿素分解后PH值 PH0:样液空白管PH值
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这是一个正常的现象。我们是以5分钟这个点时间来判断豆粕颜色变化多少的比例。时间越长红色越多没有关系。 我做过五分钟红点不到5%的,放置25分钟后红点满视野,这包括单个红点扩散的个数,但是也应该有慢反应的吧。然后用定量法检测,结果都基本在临界点0.3左右了。 而你做对照的色泽没有变化很大是因为它加热过度,脲酶活性小。 年前大的厂家像中纺,津乐等放置时间多久都不会有红点随时间延长而增多的现象,且ps都在70-85之间。 期待更多人的解答!
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