RNA提取后,跑电泳不出条带
答案:3 悬赏:30
解决时间 2021-02-16 14:28
- 提问者网友:原来太熟悉了会陌生
- 2021-02-16 02:17
RNA提取后,跑电泳不出条带
最佳答案
- 二级知识专家网友:渡鹤影
- 2021-02-16 03:24
其实你要首先理解一下电泳染色的原理。
电泳时,我们一般使用的染色剂比如EB啊,GEL-Red啊之类的,都是潜入DNA双螺旋的分子间,所以能拿来作为结合染色染料。而对于RNA,其大多为单链形式存在,这些染料还能进行染色的原因,是因为其的大分子还能发生自身或相互间的2级缠绕,使得染料还有掺入的余地。
那么,如果这些大分子发生降级或者片段化成为小片段,发生自身缠绕的和相互聚合的几率及小了很多,染料难于掺入,当然不显色。
而对于测OD值来说,我们关注的是其吸光度,吸光度这与RNA中的碱基有关,与分子结构无关,所以当然能测出值来。并且,降解和片段化的程度越高,暴露出的碱基愈多,吸光度也越大,测出的值当然也越高,这是不矛盾的。
我这么说可以理解了吧?
追问:意思就说,RNA已经降解了?
追答:是的~~~直接抓住了重点啊~~~
电泳时,我们一般使用的染色剂比如EB啊,GEL-Red啊之类的,都是潜入DNA双螺旋的分子间,所以能拿来作为结合染色染料。而对于RNA,其大多为单链形式存在,这些染料还能进行染色的原因,是因为其的大分子还能发生自身或相互间的2级缠绕,使得染料还有掺入的余地。
那么,如果这些大分子发生降级或者片段化成为小片段,发生自身缠绕的和相互聚合的几率及小了很多,染料难于掺入,当然不显色。
而对于测OD值来说,我们关注的是其吸光度,吸光度这与RNA中的碱基有关,与分子结构无关,所以当然能测出值来。并且,降解和片段化的程度越高,暴露出的碱基愈多,吸光度也越大,测出的值当然也越高,这是不矛盾的。
我这么说可以理解了吧?
追问:意思就说,RNA已经降解了?
追答:是的~~~直接抓住了重点啊~~~
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- 1楼网友:第幾種人
- 2021-02-16 05:29
RNA电泳检测都没条带,证明RNA提取失败。在做反转录PCR那肯定失败。
把RNA提取好
追问:可是为什么核酸蛋白测定会有浓度呢?
把RNA提取好
追问:可是为什么核酸蛋白测定会有浓度呢?
- 2楼网友:像个废品
- 2021-02-16 04:46
主要原因可能是你提取过程中RNA降解了。操作必须仔细,戴口罩,无酶水等等。内参和目的同时做就知道问题所在了。
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