单克隆抗体两次筛选的理由?
答案:2 悬赏:80
解决时间 2021-04-18 04:35
- 提问者网友:堕落的邪教徒
- 2021-04-17 16:54
分数再追加50
最佳答案
- 二级知识专家网友:输掉的尊严
- 2021-04-17 17:09
a 第一次筛选的原理与方法:第一次筛选是杂交瘤细胞的选择性培养。采用的hat选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(h)、氨基喋呤(a)和胸腺嘧啶核苷酸(t),其依据是细胞中的dna合成有两条途径(d途径和s途径),在hat培养液中,未融合的效应b细胞和两个效应b细胞融合的“d途径”被氨基喋呤阻断,虽“s途径”正常,但因缺乏在体外培养液中增殖的能力,一般10d左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言,由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型(hgprt)细胞,因此自身没有“s途径”,且“d途径”又被氨基喋呤阻断,所以在hat培养液中也不能增殖而很快死亡。惟有骨髓瘤细胞与效应b细胞相互融合形成的杂交瘤细胞,既具有效应b细胞的“s途径”,又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性,因此能在hat培养液中选择性存活下来,并不断增殖。
b 第二次筛选的原理和方法:通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞(理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞),再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养.
b 第二次筛选的原理和方法:通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞(理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞),再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养.
全部回答
- 1楼网友:不服输的倔强
- 2021-04-17 18:33
第一2113次:筛选出AB型细胞(A:浆细胞,B:骨髓瘤细胞),不要AA、5261BB型。
第二次:筛选出有特异性的4102杂交瘤细胞,检验阳性。
单克隆细胞特点:1653灵敏度高、特异性强、可大量制备
杂交瘤细胞特点:能体外大版量繁殖....忘记了...
详细请看人教版生物权选修三
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