求助:干细胞DAPI染色时终浓度是多少
答案:2 悬赏:40
解决时间 2021-03-21 06:12
- 提问者网友:风华是一指流沙
- 2021-03-20 16:23
求助:干细胞DAPI染色时终浓度是多少
最佳答案
- 二级知识专家网友:何以畏孤独
- 2021-03-20 17:25
干细胞DAPI染色时终浓度是多少
测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,最好是固定。
DAPI溶液是半通透性的,不固定的话,细胞染色时间得长,染料进入细胞会比较少,所以建议是固定。
DAPI 可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。
DAPI溶液使用步骤:
固定细胞或组织样品,经过固定后,适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,可先进行免疫荧光染色,染完毕后再进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行 DAPI 染色。
对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 DAPI 染色液,覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,混匀。
室温染色 5-10 分钟。
吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。
置于荧光显微镜下观察,激发波长 360-400nm。
DAPI溶液注意事项:
DAPI 被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。
DAPI溶液需避光,并尽量避免反复冻融。
荧光染料都存在淬灭问题,建议染色后尽量当天完成检测。
测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,最好是固定。
DAPI溶液是半通透性的,不固定的话,细胞染色时间得长,染料进入细胞会比较少,所以建议是固定。
DAPI 可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。
DAPI溶液使用步骤:
固定细胞或组织样品,经过固定后,适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,可先进行免疫荧光染色,染完毕后再进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行 DAPI 染色。
对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 DAPI 染色液,覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,混匀。
室温染色 5-10 分钟。
吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。
置于荧光显微镜下观察,激发波长 360-400nm。
DAPI溶液注意事项:
DAPI 被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。
DAPI溶液需避光,并尽量避免反复冻融。
荧光染料都存在淬灭问题,建议染色后尽量当天完成检测。
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- 1楼网友:情窦初殇
- 2021-03-20 18:14
我不会~~~但还是要微笑~~~:)
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