PCR扩增过程中:引物需要两个,由两边开始相向延伸,为什么不能同向延伸?
答案:4 悬赏:50
解决时间 2021-04-06 21:58
- 提问者网友:故事与他
- 2021-04-06 01:11
PCR扩增过程中:引物需要两个,由两边开始相向延伸,为什么不能同向延伸?
最佳答案
- 二级知识专家网友:桃花别处起长歌
- 2021-04-06 01:40
16s很保守,交叉使用还是扩出1.5kb没啥奇怪的,倒是200bp那个,条带很清晰还是弥散的?很清晰的话应该不是二聚体,说明交叉的一对引物正好可以扩到这么长的一段。。
说到头,没说明任何有价值的问题
说到头,没说明任何有价值的问题
全部回答
- 1楼网友:花一样艳美的陌生人
- 2021-04-06 03:51
这是因为聚合酶复制具有方向性
- 2楼网友:零负荷的放任
- 2021-04-06 03:37
PCR是链式反应。
我们可以想象同向延伸的结果,taq酶不断将dNTP加到目的片段上,在dNTP量允许的条件下目的DNA片段就会无限延伸,这样的大片段无法检测是不是你需要的那段产物。而事实情况加到反应体系里的dNTP是有限的,这样就会导致得到的产物片段大小不同。
所以如果不是相向延伸的PCR没有任何研究价值。
- 3楼网友:啵啵桃汀
- 2021-04-06 03:19
一条单链独自完成复制。两个引物一个从3'端开始延伸,一个从5'端开始延伸。
模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,于72℃左右,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链
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