为什么在过量溴化乙锭存在时,超螺旋DNA比线状DNA分子具有较高的密度?
答案:2 悬赏:30
解决时间 2021-02-14 08:20
- 提问者网友:孤笛钟情你
- 2021-02-13 13:27
为什么在过量溴化乙锭存在时,超螺旋DNA比线状DNA分子具有较高的密度?
最佳答案
- 二级知识专家网友:一池湖水
- 2021-02-13 13:58
环形DNA分子如果具有上节表中B型DNA的结构特点,则称为处于松弛状态的分子。如果环形DNA被切断,形成一个线性双螺旋分子,然后用两手分别捏住线性DNA分子的两端,捻动其中的一端或两端同时向相反的方向捻动,双螺旋可以形成过旋(overwound,沿右手螺旋方向捻动)或欠旋(underwound,沿右手螺旋相反方向捻动)结构。过旋和欠旋都会给双螺旋DNA分子增加了额外的扭转张力。
当将线性过旋或欠旋的DNA连接成环状时,为了维持B构象,DNA分子会自动形成额外的超螺旋(supercoils)来抵消过旋或欠旋造成的应力。过旋DNA会自动形成额外左手螺旋,称为正超螺旋(positive supercoils);而欠旋形成额外右手螺旋,称为负超螺旋(negative supercoils)(右图)。生物体内大多数DNA分子都处于负超螺旋结构,而正超螺旋DNA在自然界还没有发现。负超螺旋也可以通过DNA的局部解旋消除。局部解旋在DNA复制和转录的起始期间是非常重要的。
回到这个问题,加入溴化乙锭后一半会产生正超螺旋,原因可以从三点考虑
1.溴化乙锭可以插入双分子之间,减弱碱基间的作用
2.螺旋结构一部分有碱基间的作用产生,而由1知道,作用由于溴化乙锭而减弱了
3.溴化乙锭的加入,使原来和dna连接的蛋白质不能连接到dna形成nucleosome
具体应该看看dna拓扑学,上面的123使参考网站上看的,我也不太明白,你可以自己打开网页看看,希望对你有帮助
当将线性过旋或欠旋的DNA连接成环状时,为了维持B构象,DNA分子会自动形成额外的超螺旋(supercoils)来抵消过旋或欠旋造成的应力。过旋DNA会自动形成额外左手螺旋,称为正超螺旋(positive supercoils);而欠旋形成额外右手螺旋,称为负超螺旋(negative supercoils)(右图)。生物体内大多数DNA分子都处于负超螺旋结构,而正超螺旋DNA在自然界还没有发现。负超螺旋也可以通过DNA的局部解旋消除。局部解旋在DNA复制和转录的起始期间是非常重要的。
回到这个问题,加入溴化乙锭后一半会产生正超螺旋,原因可以从三点考虑
1.溴化乙锭可以插入双分子之间,减弱碱基间的作用
2.螺旋结构一部分有碱基间的作用产生,而由1知道,作用由于溴化乙锭而减弱了
3.溴化乙锭的加入,使原来和dna连接的蛋白质不能连接到dna形成nucleosome
具体应该看看dna拓扑学,上面的123使参考网站上看的,我也不太明白,你可以自己打开网页看看,希望对你有帮助
全部回答
- 1楼网友:萝莉姐姐鹿小北
- 2021-02-13 15:08
一、细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒俯籂碘饺鄢祭碉熄冬陇载体(如puc系列)都能复制到很高的拷贝数,惟致只要将培养物放在标准lb 培养基中生长到对数晚期,就可以大量提纯质粒。此时,不必造反性地扩增质粒dna。然而,较长一代的载体(如pbr322)由于不能如此自由地复制,所以需要在得到部分生长的细菌培养物中加入氯霉素继续培养若干小时,以便对质粒进行性扩增。氯霉素可抑制宿主的蛋白质合成,结果阻止了细菌染色体的复制,然而,松弛型质粒仍可继续复制,在若干小时内,其拷贝数持续递增。这样,像pbr322-类的质粒,从经氯霉素处理和未经处理的培养物中提取质粒的产量迥然不同,前者大为增高。多年来,加入足以完全抑制蛋白质合成的氯霉素(μg/ml)已成为标准的操作、用该方法提取的质粒dna量,对于分子克隆中几乎所有想象到的工作任务
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