聚丙酰胺凝胶电泳中浓缩胶的浓缩机制是什么？

聚丙酰胺凝胶电泳中浓缩胶的浓缩机制是什么？

浓缩胶的作用是有堆积作用，凝胶浓度较小，孔径较大，把较稀的样品加在浓缩胶上，经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液，电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后，HCL解离成氯离子，甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷，因此一起向正极移动，其中氯离子最快，甘氨酸根离子最慢，蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大，超过蛋白，因此在后面形成低电导区，而电场强度与低电导区成反比，因而产生较高的电场强度，使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动，形成以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。

在上样孔里加样的时候样品是有一定的高度的，样品里的蛋白没有站在一条起跑线上。浓缩胶的作用就是压缩样品中的蛋白质成为一条细线站在同一条起跑线上，这样影响蛋白迁移速率的因素就只有分子量的大小了，也就更有可比性了。