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基因表达载体导入受体细胞后,筛选的依据是什么?转基因植物鉴定的标准是什么?

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解决时间 2021-02-19 05:24
基因表达载体导入受体细胞后,筛选的依据是什么?转基因植物鉴定的标准是什么?
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表达载体都有抗生素标记基因,根据相应的抗生素进行筛选。有一些载体有融合表达的蛋白GUS、GFP等,这些也可以作为一个标准看看基因有没有表达,但筛选必须是抗生素。
但商业化的转基因植物,标记基因都已经记过了剔除(理论上推广前,标记基因是必须剔除的,这个也是质疑转基因的一个方面,也是需要公众监督的地方),所以只能根据具体转进去的基因为标准进行鉴定。
举例:
转BT蛋白,因为BT蛋白是外源片段,本身植物体内是没有相关序列的,可以以BT序列为探针做southern杂交(这个方法、在以亲本为对照的前提下、不论内源还是外源基因都是可行的)。
现在也有商业化的BT试纸,把转基因植物的胚芽磨碎、水溶,可以测出来。
PS:以35S等一些启动子为探针鉴定也是可以的,但是商业化的转基因作物是不应该用35S这类组成型启动子。因为它是没有特异性的,哪里都有表达,这个同样需要监督和管理。
全部回答
可以通过筛选标记,如通过表达载体里面的抗性或蓝白斑来筛选 转基因植物可以通过表型或表达产物来鉴定,还可以通过提取基因进行RT-PCR鉴定,通过western blotting \免疫杂交,组织免疫或显色等来鉴定
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