反相HPLC平衡柱子时每换一次流动相都会出峰,怎么回事?

做反相HPLC平衡柱子时,用100%甲醇平衡基线平了之后,又用50%甲醇平衡,还没上样就出现峰了,过一会儿平了,再换上20%甲醇冲洗有出现峰了.用乙睛也是一样,100%乙睛想出现峰过一会儿又平衡,再降低浓度又出现峰.怎么回事?

基线的稳定只是相对稳定的流动相，所以这是很正常的。

这个是正常的。不同浓度的标准不同，相对应原来的就有一个缓冲的状况。

这是正常现象，基线的稳定只是相对稳定的流动相。应该说这些不同浓度的流动相是用来冲洗柱子的，并不是用来平衡柱子的。每次使用之前只需用低浓度的有机相冲洗一下柱子就可以换成流动相直接平衡柱子。

A相和B相刚开始混合的时候很容易引起吸收值的波动，甚至压力的波动。

你好！ 首先说一下，乙睛?应该是乙腈（jing）。1、柱子用的时间太长，杂质太多。2、色谱级的甲醇和乙腈用之前，应该用超声波超声脱气体。 希望对你有所帮助，望采纳。