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怎样摸索PCR条件

答案:3  悬赏:40  
解决时间 2021-02-26 21:57
我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带
最佳答案
一般来说进行pcr摸索条件主要有3个,退火温度、Mgcl2浓度、模板上样量。

如果你要摸索的话,建议先固定某两个值,比如Mgcl2浓度、模板上样量一定,然后退火温度取60、58、56、54等不同温度进行PCR,这样慢慢摸索的话,只要引物正确,一般是能出带的。
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退火温度、Mgcl2浓度、模板上样量,也可以调节一下taq酶的量,如果都不行(在阳性对照没问题的情况下),那你要问一下你的引物问题了
一般来说进行pcr摸索条件主要有3个,退火温度、mgcl2浓度、模板上样量.如果你要摸索的话,建议先固定某两个值,比如mgcl2浓度、模板上样量一定,然后退火温度取60、58、56、54等不同温度进行pcr,这样慢慢摸索的话,只要引物正确,一般是能出带的.
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