双荧光素酶检测 pgl3-basic数值有10的6次方数量级，理论上不应该检测到数值，这是什么原因呢？请教各位了！
答案:1 悬赏:0
解决时间 2021-11-09 22:00
- 提问者网友：贪了杯
- 2021-11-09 00:08
双荧光素酶检测 pgl3-basic数值有10的6次方数量级，理论上不应该检测到数值，这是什么原因呢？请教各位了！
最佳答案
- 二级知识专家网友：逃夭
- 2021-11-09 00:29
靶基因不是应该构建在basic vector, promoter vector 或是enhance vector中吗？是promega的载体吗？
真的有很多因素可以影响到比如：平行孔中细胞状态、转染效率、加样准确性等等都会影响的。
其次我觉得你的荧光值太低了吧，接近于本底值了，可信度不好，我做的时候，PRL的荧光值能达到7位数啊，这样会减少其他因素的干扰作用，波动相对来说很小（使用的是Promega的试剂盒）。我们做双荧光时，内参PRL-TK和PGL3的用量不是按照protocol上的50：1来的，而是5：1，PGL3的荧光值和PRL的在一个数量级上。重复性挺好的
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