目的基因Ct

我的内参基因的Ct在20，目的基因在32了，两者的融曲没有杂峰，而且我之前验证过我的目的基因和内参的引物扩增效率很接近，我的目的基因Ct这么大怎么办呢？求大神指教！

你的情况肯定属于目的基因表达量太低的原因造成的，这种情况果断采用探针法定量，数据结果才可信，推荐一款探针法试剂AceQ qPCR Probe Master Mix，灵敏度和特异性都很好。

不同基因之间表达量差异很大，可达上千甚至上万倍之差，所以ct值差10以内属正常现象，但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因，如果目标基因和内存基因表达量（ct值差）过大，用内参基因来衡量目标基因的表达量（绝对值）就不完全可靠，但至少可以说明目标基因表达非常低。