PCR纯化的原理

答案:4 悬赏:30

解决时间 2021-12-31 06:50

提问者网友：椧運幽默
2021-12-31 02:15

PCR纯化的原理

最佳答案

二级知识专家网友：神也偏爱
2021-12-31 02:43

你说的是PCR产物的纯化吧？
先用溶液溶解含DNA的琼脂糖凝胶，然后加入有吸附柱的离心管中
吸附柱吸附DNA
离心，将含琼脂糖的溶液去除；
接下来加入去盐的漂洗液进一步去除杂质；因PH值的原因，DNA还是吸附在吸附柱上的膜上；
最后加入纯水或者TE溶解液，在这个条件下DNA会溶解在其中，通过离心将液体离下来，得到的液体就是纯化好的PCR产物了

全部回答

1楼网友：酒醒三更
2021-12-31 06:09

1 过柱回收，利用XX膜吸附DNA；
2 磁珠吸附纯化DNA
3 玻璃奶吸附纯化DNA
具体的问人家试剂公司吧

2楼网友：青尢
2021-12-31 05:02

可以到QIAGEN，博大泰克，TAKALA等公司网站上去看具体产品！

3楼网友：白昼之月
2021-12-31 03:52

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。

参考资料：百度百科

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