如何检测cDNA的质量
答案:2 悬赏:30
解决时间 2021-02-14 16:15
- 提问者网友：沉默的哀伤
- 2021-02-14 02:59
如何检测cDNA的质量
最佳答案
- 二级知识专家网友：青春如此荒謬
- 2021-02-14 03:08
cDNA一般是不检测的，并且也不好检测，因为你的cDNA都是mRNA，电泳出来会是一条弥散的带。并且上样量需要较大才能看间。
需要检测的是提取的RNA，看是否28s和18s rRNA是否清晰、明显(二者位置分别在5kb和2kb处）。最大rRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0倍，否则表示RNA样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
如果RNA抽提没有问题，那么RT产生的cDNA一般来说是不会出现问题的。
需要检测的是提取的RNA，看是否28s和18s rRNA是否清晰、明显(二者位置分别在5kb和2kb处）。最大rRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0倍，否则表示RNA样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
如果RNA抽提没有问题，那么RT产生的cDNA一般来说是不会出现问题的。
全部回答
- 1楼网友：许你一世温柔
- 2021-02-14 04:00
?苊庥谢?蜃椴杏唷ｓ蟹?弦?蟮哪康幕?虻囊?锔?昧耍??潜泶锪可俚幕叭菀谮不出来
反转要成功，首先rna要好，操作要小心，rnasin要加，dntp要新的（至少也是rt专用的）。热变性要充分虫子火箭兵(站内联系ta)mrna本身在电泳检测是就是弥散状态，反转录后的cdna也应该是弥散状态，判断其质量好坏还得通过rt-pcr的方法验证
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