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高中生物 基因重组 目的基因的检测与鉴定 利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无 利用分子杂交

答案:3  悬赏:60  
解决时间 2021-03-03 04:59
高中生物
基因重组 目的基因的检测与鉴定
利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无
利用分子杂交技术检测目的基因的翻译
不懂原理,求点播(^_^)
最佳答案
献给你说检测基因的有无
高中水平你知道基因是一段具有生物学功能的DNA序列就可以了,什么叫生物学功能呢?就是可以翻译成为具有功能的蛋白质,或者转录为具有功能的RNA(比如tRNA,功能就是携带氨基酸)
那么基因的本质是DNA(RNA病毒除外),即一段特定的DNA序列,比如ATTGGC……
检测有没有目的基因,你需要先知道 目的基因的序列,然后体外合成扩增或用其他手段获得这样一段特定的DNA序列的互补序列如上例就是5‘GCCAAT3’,然后将你需要检测的样本的DNA提取出来,在然后用你准备好的互补序列去和你的提取样本放在一起退火(意思是可以互补的单链DNA回复双链)你可以给你的探针上的磷用同位素标记,当你退火一段时间,冲洗样本,将没有配对的探针洗去,检测样本有没有磷同位素标记,如果有,说明探针和目的基因互补配对了,说明目的基因存在如果没有,说明不存在目的基因,就这样.
其实原理就是碱基互补配对。
检测目的基因的翻译,我想你要说的其实是转录吧!
我假设你要检测的翻译蛋白质的基因的转录,那转录物就是mRNA,高中的知识应该告诉你了,mRNA(真核)3‘端具有多聚A的尾巴,那么我用多聚T的探针(探针另一头我可以连接在一个固定物体上)去和细胞中的mRNA配对,然后将细胞内所有的mRNA都抽提出来(因为是AAAAAAA和TTTTTT配对,没有特异性,注意前面的探针是具有特异性的)这个时候,你有两种选择:1.用目的基因的探针直接和mRNA配对来检测 2.将mRNA逆转录会cDNA,然后在用探针检测
个人觉得2方案更好,因为逆转录以后可以PCR扩增,这样大量探针和大量的目的基因杂交,如果能配对,信号强易检测,置信度大。
就是这样,纯原创。
全部回答
先从基因文库中构建目的基因然后导入受体细胞,用dna分子探针进行杂交鉴定,看有没有分子杂交带。
杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针对已知序列进行特异性的靶序列检测。
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