如题,如何查询SD大鼠烟碱受体α4亚基和β2亚基的PCR引物序列,多谢
感谢以上回复,麻烦请说详细一点,谢谢
请教高手,如何查询PCR引物序列
答案:2 悬赏:20
解决时间 2021-03-04 00:59
- 提问者网友:绿海猖狂
- 2021-03-03 07:56
最佳答案
- 二级知识专家网友:飘零作归宿
- 2021-03-03 08:40
1、到NCBI上面的genebank寻找你所需基因的序列,也可以借助BLAST工具。
2、利用软件或者手工根据你的需要设计对基因序列进行引物序列。常见软件有Primer Premier5.0、DNAstar、 Olige6等。如果需要克隆片段不大,手工设计也可以。
2、利用软件或者手工根据你的需要设计对基因序列进行引物序列。常见软件有Primer Premier5.0、DNAstar、 Olige6等。如果需要克隆片段不大,手工设计也可以。
全部回答
- 1楼网友:桑稚给你看
- 2021-03-03 09:47
提取细胞总rna然后用试剂盒反转录成cdna,用cdna作为模板扩增基因的cds区,然后想要转染进细胞中。比如myod1基因,首先在ncbi找到它的mrna序列,然后找到它的cds序列,全部复制下来,在primer 5.0 中。正向引物直接从cds的第一个核酸开始(比如18bp),反向引物从cds最后一个核酸开始,向前选择序列(比如17bp),调节2个引物的长度(不一定要一致),尽量避免错配,二聚体,产生错的产物即可。最后在引物的5‘端添加酶切位点以及保护碱基。
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