blot 转膜是应该加甲醇还是不该加

blot 转膜是应该加甲醇还是不该加

westernblot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在westernblot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以westernblot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用

western blot转膜不用甲醇可以 蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即western blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。 蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里希生物研究所（friedrich miescher institute）的harry towbin在1979年提出的。在尼尔·伯奈特（neal burnette）于1981年所著的《分析生物化学》（analytical biochemistry）中首次被称为western blot。蛋白免疫印迹（western blot）是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物nc膜或pvdf膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。