大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体.某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中,如果没有插入外源基因,LacZ基因便可表达出口一半乳糖苷酶.当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β一半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落.反之,则形成白色菌落.下图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程.请分析并回答:(1)已获得的目的基因可利用______技术进行扩增.(2)目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中,需要DNA连接酶恢复______键.(3)将试管I中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是______;大肠杆菌需事先用Ca2+进行处理,目的是______.(4)将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上培养,培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质包括______和生长因子,还应加入IPTG、X-gal以及氨苄青霉素,其中加入氨苄青霉素的作用是筛选出______.(5)若观察到培养基上出现______色菌落,则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒.如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因,则不利于重组质粒的筛选,原因是______.
大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体.某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中,如果没
答案:2 悬赏:10
解决时间 2021-03-13 03:41
- 提问者网友:逝爱
- 2021-03-12 04:43
最佳答案
- 二级知识专家网友:专属的偏见
- 2021-03-12 05:03
(1)PCR技术能在短时间内大量扩增目的基因,所以已获得的目的基因可利用PCR技术进行扩增.
(2)DNA连接酶连接形成的是磷酸二酯键.
(3)将试管I中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是使目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达,即进行转化;大肠杆菌需事先用Ca2+进行处理,增大细胞壁的通透性,使之处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态.
(4)培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质包括碳源、氮源、无机盐、水和生长因子.由于质粒上含有氨苄青霉素抗性基因,因此导入质粒的大肠杆菌能抗氨苄青霉素,所以培养基中还应加入氨苄青霉素,作用是筛选出导入pUC18质粒的大肠杆菌.此外培养基中还应加入IPTG、X-gal.
(5)重组质粒上的LacZ基因被破坏,不能产生β一半乳糖苷酶,若大肠杆菌中已成功导入了重组质粒,则其在含有IPTG和X-gal的培养基中形成白色菌落.如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因,则无论大肠杆菌是否导入重组质粒,均会呈现蓝色菌落,这样不利于重组质粒的筛选.
故答案为:
(1)PCR
(2)磷酸二酯
(3)进行转化 使大肠杆菌细胞处于感受态
(4)碳源、氮源、无机盐、水 导入pUC18质粒的大肠杆菌
(5)白 无论大肠杆菌是否导入重组质粒,均会呈现蓝色菌落
(2)DNA连接酶连接形成的是磷酸二酯键.
(3)将试管I中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是使目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达,即进行转化;大肠杆菌需事先用Ca2+进行处理,增大细胞壁的通透性,使之处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态.
(4)培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质包括碳源、氮源、无机盐、水和生长因子.由于质粒上含有氨苄青霉素抗性基因,因此导入质粒的大肠杆菌能抗氨苄青霉素,所以培养基中还应加入氨苄青霉素,作用是筛选出导入pUC18质粒的大肠杆菌.此外培养基中还应加入IPTG、X-gal.
(5)重组质粒上的LacZ基因被破坏,不能产生β一半乳糖苷酶,若大肠杆菌中已成功导入了重组质粒,则其在含有IPTG和X-gal的培养基中形成白色菌落.如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因,则无论大肠杆菌是否导入重组质粒,均会呈现蓝色菌落,这样不利于重组质粒的筛选.
故答案为:
(1)PCR
(2)磷酸二酯
(3)进行转化 使大肠杆菌细胞处于感受态
(4)碳源、氮源、无机盐、水 导入pUC18质粒的大肠杆菌
(5)白 无论大肠杆菌是否导入重组质粒,均会呈现蓝色菌落
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- 1楼网友:不服输的倔强
- 2021-03-12 06:18
任务占坑
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