做菌落pcr鉴定后放在室温内在做电泳会有影响么

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解决时间 2021-02-12 18:19

提问者网友：沉默的哀伤
2021-02-12 08:22

最佳答案

二级知识专家网友：陪衬角色
2021-02-12 09:57

做菌落pcr鉴定后放在室温内在做电泳会有影响
菌落PCR鉴定是T载体克隆连接后鉴定是否有阳性克隆（含插入片段）最方便快捷的方法.但是市面上能见到的菌落PCR鉴定试剂盒采用的都是T3,T7或者SP6等特异T载体引物,只能用于某种特定T载体连接阳性克隆的鉴定.如果使用不同T载体,便需同时购买多种鉴定试剂盒,大大增加了使用成本.本公司采用通用T载体引物研制的通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒,只需购买一种试剂盒,便可用于市面上所有常见的T载体(包括pGEM,pUC,pBluescript系列) 连接阳性克隆的鉴定.此外,采用T3,T7或者SP6做引物的菌落PCR鉴定试剂盒引物距离插入位点的距离非常短,因此在鉴定100bp左右或者更小片段的插入时,阴性克隆的引物二聚体条带和阳性克隆扩增条带大小接近,无法区分.往往把引物二聚体的条带看成是阳性扩增条带,造成假阳性.反之,造成假阴性.本试剂盒通用T载体引物在未插入片段时的距离至少有150bp以上,加上插入片段的长度,可以清晰的区分是插入片段扩增出的条带还是引物二聚体扩增出的条带.避免假阳性或者假阴性,大大提高了准确性.

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1楼网友：何以畏孤独
2021-02-12 10:16

期待看到有用的回答！

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